本發(fā)明涉及糖肽的富集方法,具體地說(shuō)是一種聚乙二醇偶聯(lián)結合超濾分離富集糖肽的方法;N-連接糖蛋白質(zhì)經(jīng)過(guò)酶解產(chǎn)生的肽段混合物中加入高碘酸,糖鏈上的順式鄰二醇經(jīng)氧化生成醛基,通過(guò)反相色譜除鹽去除多余的高碘酸;向氧化后的肽段混合物中加入單甲氧基聚乙二醇酰肼(mPEG-Hz),在乙酸-乙酸鈉緩沖液中糖肽與聚乙二醇偶聯(lián);將反應產(chǎn)物加入超濾離心管樣品池中,經(jīng)過(guò)清洗和離心過(guò)濾將糖肽和非糖肽分開(kāi);糖肽保留在濾膜內,非糖肽離心到濾膜外;向樣品池中再加入肽N-糖苷酶F(PNGaseF)的碳酸氫銨緩沖液,酶解后將肽段從其糖基化位點(diǎn)處酶切下來(lái),經(jīng)過(guò)離心即可獲得含糖基化位點(diǎn)的肽段。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)為:是一種普適性的糖肽富集方法,具有較好的選擇性,操作步驟簡(jiǎn)單,非特性吸附的清洗比較容易,成本較低。
院屬單位：中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所
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